研究發(fā)現(xiàn)沙門氏菌對抗生素具有抗藥性
根據(jù)社會發(fā)展部的一項(xiàng)調(diào)查，沙門氏菌屬的細(xì)菌是1999年至2009年巴西報(bào)告的42.5%實(shí)驗(yàn)室證實(shí)的食源性疾病暴發(fā)的病原體。導(dǎo)致急性腹瀉的主要細(xì)菌的全基因組測序是由圣保羅大學(xué)RibeirãoPreto藥學(xué)院(FCFRP-USP)教授JulianaPfrimerFalcão領(lǐng)導(dǎo)的圣保羅大學(xué)研究小組的研究重點(diǎn)。
巴西衛(wèi)生部在2000年至2015年期間收到了11,524起食源性疾病爆發(fā)的報(bào)告，其中219,909人患病，167人死于這些疾病。細(xì)菌引起大多數(shù)此類疾病的爆發(fā)，包括腹瀉和腸胃炎。zui常見的是沙門氏菌，在此期間診斷出31,700例(占總數(shù)的14.4%)，金黃色葡萄球菌(7.4%)和大腸埃希氏菌(6.1%)。
在PLOS ONE發(fā)表的一篇文章中，屬于Falcão實(shí)驗(yàn)室的生物醫(yī)學(xué)科學(xué)家Amanda Aparecida Seribelli和Fernanda Almeida描述了他們?nèi)绾螠y序和研究90株特定血清型腸道沙門氏菌的基因組，稱為鼠傷寒
(S. Typhimurium)的縮寫。腸沙門氏菌亞種血清型鼠傷寒沙門氏菌(Salphella entericasubspecies serovar Typhimurium)。
1983年至2013年間，在里約熱內(nèi)盧的RibeirãoPreto(巴西圣保羅州)的Adolfo Lutz研究所和里約熱內(nèi)盧的Oswaldo Cruz基金會(Fiocruz)分離出90株菌株。他們提供了過去30年來巴西沙門氏菌病的流行病學(xué)概況，來自該國所有地區(qū)，并從食源性感染患者或家禽，豬肉，生菜和其他蔬菜等受污染食物中收集。
“從人類來看，我們收到了血液，腦膿腫和腹瀉糞便樣本，”Seribelli說。
當(dāng)對90種菌株中的每一種中的抗生素的作用進(jìn)行測試時(shí)，發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)抗生素對作為藥物庫的一部分的不同類別的抗生素具有抗性。該研究還確定了39種抗生素耐藥基因。隸屬于Fiocruz，圣保羅州立大學(xué)土地和獸醫(yī)學(xué)院(FCAV-UNESP)和Adolfo Lutz研究所的研究人員參與了這項(xiàng)研究。在Almeida的博士期間，在美國食品和藥物管理局(FDA)對90株鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行了測序。
對巴西人類和食品中分離的鼠傷寒沙門氏菌菌株的基因組，轉(zhuǎn)錄組和表型進(jìn)行的比較分析得到了圣保羅研究基金會--FAPESP，F(xiàn)DA和教育部教育發(fā)展辦公室(CAPES)的支持。
抵抗的起源
對SNP的分析鑒定了39種對不同類別的抗微生物或抗生素具有抗性的基因，例如氨基糖苷，四環(huán)素，磺胺，，β-內(nèi)酰胺，氟喹諾酮，苯酚和大環(huán)內(nèi)酯。在一些基因中也發(fā)現(xiàn)了點(diǎn)突變，例如gyrA，gyrB，parC和parE。
“令人驚訝的是，鼠傷寒沙門氏菌對抗生素具有抗藥性，可用于治療這種疾病，”Seribelli說。“這些藥物可供醫(yī)生用于對抗表現(xiàn)出抗藥性的感染。當(dāng)微生物未被患者的免疫系統(tǒng)殺死時(shí)，它們是第二道防線，因?yàn)樯抽T氏菌病通常是自限性的，不需要使用抗生素。主要問題是當(dāng)這種情況失敗并且細(xì)菌變得具有侵入性。“
吸引科學(xué)家注意的另一點(diǎn)是30年樣本采集期間菌株的抗性差異。“20世紀(jì)90年代中期收集的鼠傷寒沙門氏菌的樣本顯示出比晚年樣本對抗生素的抗性更強(qiáng)。這可以通過20世紀(jì)90年代早期出現(xiàn)的血清型腸炎沙門氏菌來解釋，后者已成為主要的一種。沙門氏菌感染的原因，“塞里貝利說。腸炎沙門氏菌自20世紀(jì)50年代以來就已為人所知，但有一段時(shí)間，它引起的疾病病例較少。這種情況從腸炎沙門氏菌大流行改變而來，該流行病始于20世紀(jì)80年代末和90年代初的歐洲，然后傳播到世界各地。
“從那以后，腸炎沙門氏菌一直是巴西和*zui流行的血清型之一。因此，它是一種血清型，如果必要的話也可以與抗生素作斗爭，”Seribelli說。
根據(jù)Almeida的說法，鼠傷寒沙門氏菌仍然是巴西和世界范圍內(nèi)從人類，動物和食物中分離出來的主要血清型之一。
自20世紀(jì)90年代中期的腸炎沙門氏菌大流行以來，與20世紀(jì)90年代以前的流行病相比，抗性菌株的數(shù)量明顯減少，但是這些菌株的毒力是否增加以使它們適應(yīng)這一新的生態(tài)位是未知的。“這項(xiàng)研究的主要發(fā)現(xiàn)是在樣本中發(fā)現(xiàn)了大量的抗性基因，考慮到它們是從人類和食物中分離出來的。這表明當(dāng)今巴西含沙門氏菌食物的污染風(fēng)險(xiǎn)非常大。對抗生素有抗藥性，“阿爾梅達(dá)說。
沙門氏菌病
沙門氏菌包括兩種，即S. bongori和S. enterica。后者是種類，具有大量亞種和血清型，導(dǎo)致比巴西和*任何其他物種更多的食源性感染。人和動物腸道是這種病原體的主要天然宿主，家禽，豬肉和相關(guān)食品是主要的傳播媒介。腸道沙門氏菌的六個(gè)亞種細(xì)分為2,600個(gè)血清型。血清型(血清學(xué)變體的縮寫)是細(xì)菌或病毒種類中的明顯變異，其特征在于具有相同數(shù)量的特異性表面抗原。
從流行病學(xué)的角度來看，腸道沙門氏菌zui重要的亞種是腸道沙門氏菌亞種，它引起食源性感染，稱為沙門氏菌病。癥狀是腹瀉，發(fā)燒，胃痙攣和嘔吐。
S. entericasubsp。腸桿菌是2000年至2015年巴西報(bào)告的31,700例沙門氏菌病的主要原因。該亞種zui常分離的血清型是鼠傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌。腸炎沙門氏菌是引起沙門氏菌病的主要血清型之一。它首先傳播于20世紀(jì)90年代在歐洲開始的大流行。鼠傷寒沙門氏菌是大流行前zui常見的血清型，并繼續(xù)引起感染。
據(jù)Almeida稱，該研究中分析的所有90個(gè)菌株屬于鼠傷寒沙門氏菌。FCFRP-USP的另一位研究員(也在該大學(xué)的，毒理學(xué)和色譜分析實(shí)驗(yàn)室工作)目前正在測序和分析含有血清型腸炎沙門氏菌的樣品。
Almeida于2015年將90株鼠傷寒沙門氏菌帶到了美國。“他們的基因組在馬里蘭州食品安全和應(yīng)用營養(yǎng)中心的研究員Marc W. Allard的監(jiān)督下進(jìn)行了測序，”他說。鼠傷寒沙門氏菌的基因組含有470萬個(gè)堿基對。簡要反思告訴我們，該研究產(chǎn)生了大量數(shù)據(jù)，更具體地說是4.23億個(gè)堿基，對應(yīng)于90個(gè)基因組的總和。
回到RibeirãoPreto后，Almeida與Seribelli合作，對各種菌株的基因組進(jìn)行了比較分析，以了解它們的多樣性和它們之間的進(jìn)化關(guān)系。
根據(jù)Almeida的說法，所使用的技術(shù)是使用SNP進(jìn)行高通量基因分型(發(fā)音為“snips”和單核苷酸多態(tài)性的簡稱)，這使他們能夠通過DNA測序鑒定每個(gè)菌株的遺傳組成(基因型)。SNP是遺傳變異的zui常見標(biāo)記。系統(tǒng)發(fā)育結(jié)果將90株鼠傷寒沙門氏菌分為兩組，A組和B組。
“從食物中采集的樣本組與從人類采集的樣本不同，”Seribelli解釋說。“食物分離物以相對相似的數(shù)量分布在A組和B組之間，這表明在巴西的食物中有不止一種亞型流行。人類分離株在B組中更為普遍，這表明特定的亞型可能適應(yīng)了人類。”
在由FAPESP資助的研究的另一個(gè)重要部分中，科學(xué)家測量了90種菌株中每種菌株的抗生素耐藥性。根據(jù)該研究，65株(72.2%)的菌株證實(shí)對磺胺類藥物有抗藥性，44例(48.9%)對鏈mei素，27例(30%)為四環(huán)素，21例(23.3%)為慶大mei素，7例(7.8%)為，頭孢菌塐抗生素。
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