α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的反應(yīng)方法
產(chǎn)品名稱(chēng)：α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
英文名稱(chēng)：HBDH
反應(yīng)方法：IFCC（速率法）
樣本類(lèi)型：血清
背景介紹：
α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）是一種酶，存在于人體各組織中，以心肌組織含量最多，約為肝臟的2倍，其活性達(dá)總酶活力的一半以上。它不是一個(gè)獨(dú)立的特異酶，而是乳酸脫氫酶（LDH）的一種同工酶，能催化α-羥丁酸氧化為α-酮丁酸。當(dāng)心肌受損時(shí)，α-羥丁酸脫氫酶就會(huì)釋放到血中，所以血清α-羥丁酸脫氫酶在發(fā)生心肌疾病時(shí)明顯增高。
檢驗(yàn)原理：
主要基于酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)原理。在速率法中，通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物或底物的濃度變化，可以計(jì)算出酶促反應(yīng)的速率，從而確定酶的活性。
對(duì)于α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）的速率法檢測(cè)，通常使用α-酮丁酸作為底物，在適當(dāng)?shù)?/span>pH和溫度下，HBDH催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸，同時(shí)伴隨著NADH（還原型煙-酰胺腺嘌呤二核苷酸）的生成。反應(yīng)過(guò)程中，通過(guò)監(jiān)測(cè)NADH的生成速率，可以間接推算出HBDH的活性。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
送樣須知：
1.南京和上海地區(qū)的客戶(hù)可提供上門(mén)取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系
2.外地客戶(hù)可郵寄樣本，樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請(qǐng)務(wù)必提前告知
4.測(cè)試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后，樣本可以保留1個(gè)月，若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
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